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薄层层析法 (如何减少影响色谱效果的因素?)

作者:陆质彬 生活经验 2023-05-19 04:40:15 阅读:19

各位网友们好,相信很多人对薄层层析法都不是特别的了解,因此呢,今天就来为大家分享下关于薄层层析法以及薄层层析法选择展开剂的原理的问题知识,还望可以帮助大家,解决大家的一些困惑,下面一起来看看吧!

薄层层析法 (如何减少影响色谱效果的因素?)

本文目录一览

薄层层析法的原理是什么?

先制备薄层板,即在大小适当的玻璃板上,均匀涂上吸附剂,厚度在一毫米以内,然后在距底边1。5厘米处点上样品溶液,形成一个小点,称为“原点”。再将薄层板置于盛有动相溶剂的玻缸内(此溶剂称为“展开溶剂”,玻缸称为“展开槽”)。

当溶剂沿薄层扩散到距原点以上一定距离时,取出薄层板,记录展开溶剂扩展前沿距原点的距离A。用喷洒显色试剂或紫外光线照射的方法使被分离的化合物显色,此过程称为“显谱”。观察并记录所显斑点的中心距原点的距离。斑点在薄层板上的位置通常用比移值(Rf)表示。

基本原理:

薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。

吸附是表面的一个重要性质。任何两个相都可以形成表面,吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上,都可能发生吸附现象。

以上内容参考:百度百科-薄层色谱法

在薄层层析实验中,在一定条件下为什么可利用Rf值来鉴定化合物

在特定的展开剂中,Rf值几乎可以认为是物质的特性之一。取标准品和样品,如果在两个以上的展开剂系统中,样品都有和标准品相同Rf的点,基本可以确定样品中含有标准品。

如果样品在多种展开剂中,都显示只有一个点,而这个点的Rf和标准品(或者报道的标准品的)Rf总是相同,那么此样品就是标准品所含物质。

将吸附剂、载体或其他活性物质均匀涂铺在平面板(如玻璃板、塑料片、金属片等)上,形成薄层(常用厚度为0.25毫米左右)后,在此薄层上进行层析分离的分析方法。

扩展资料:

在薄层、溶剂、温度等各项实验条件恒定的情况下,各物质的Rf值是不变的,它不随溶剂移动距离的改变而变化。Rf与分配系数K的关系:

Rf=1/(1+αK),α是由薄层性质决定的一个常数。由此可见,K值愈大,溶质分配于固定相的趋势愈大,而Rf值愈小;反之,K值愈小,则分配于流动相的趋势愈大,Rf值是定性分析的重要指标。

在流动相、固定相和展开条件固定时,Rf值是组分的特性,可用以进行定性鉴别。实用时也常将样品与已知纯物质同时展开,比较二者移动情况,进行定性分析。

参考资料来源:百度百科--薄层层析

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